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      Vigorous Biotechnology

      威格拉斯生物技術

      (北京)有限公司

      新試劑 新技術 高質量 低價格

      質粒提取純化技術概述

      質粒DNA提取純化,是分子生物學中最基礎的工作。獲得一定純度和一定量的質粒DNA,是保證后續研究工作成功的前提條件。如果質粒僅需電泳鑒定,通過簡單的細菌裂解和醇沉淀步驟, 獲得少量的質粒DNA已可勝任。然而通常情況下,質粒DNA還需要酶切、測序鑒定,以及應用于體外轉錄、細胞轉染等工作,就要求提取的質粒DNA有足夠的含量和純度。

      質粒提取中主要的雜質是基因組DNA、RNA、蛋白質、菌多糖(內毒素)等。提取純化中還可能殘留鹽份、有機物等外來雜質。酚/氯仿抽提或氯化銫超離心是實驗室小量及大量質粒純化的經典手段。 然而,酚/氯仿抽提僅能部分去除蛋白雜質;氯化銫超離心需要特定儀器,耗時費力,且成本高昂。

      商品化的質粒提取純化試劑盒,一般是通過一些基質材料吸附質粒DNA,清除其他雜質。各種試劑盒因采用的基質材料差異和清洗液體配方的不同,獲得質粒DNA的總量、純度各不相同。總的來說, 柱離心純化方法,對于普通質粒的小量提取和一般應用(如酶切、測序)應可勝任。

      大量質粒提取純化,采用柱離心的方法,往往存在回收率低、質量不穩定、操作麻煩、費時費力的缺點。國際上通行的大量質粒提取純化技術,是采用特殊基質材料利用濾過吸附和清洗的方法, 這種方法幾乎成為國外一般實驗室的唯一選擇。在目前國內尚無同型產品生產能力的情況下,進口產品的“高貴”價格,成為這種“尋常”技術普及國內實驗室的障礙。

      近年來,隨著分子生物學研究的拓展,大片斷和超大片斷DNA的克隆技術越來越普遍。因此而來的大質粒和超大質粒的工作也隨之常見。對大質粒和超大質粒的純化,基質材料吸附方法, 由于基質對大分子DNA損傷嚴重,無論是采用柱離心還是濾過吸附,都存在操作的困難,結果很難得到純化的質粒。

      本公司提供一系列質粒提取純化試劑盒,為實驗室從一般質粒小量操作到大量提取純化,以及大質粒和超大質粒的操作,提供各種解決方案。本公司產品以卓越的品質和平實的價格, 為實驗室質粒提取純化工作提供有效的幫助。特別推薦的產品,是大量質粒提取純化試劑盒。該產品采用我公司獨有技術,不需過柱,能夠對一般質粒和超大質粒進行有效純化, 得到的質粒DNA可以應用于細胞轉染、動物體內實驗等要求嚴格的各種工作中。本產品經許多實驗室長期使用,獲得滿意的結果。目前在國際市場上,尚無同型產品出現。

      需要指出的一個技術問題是,無論哪個公司的質粒提取純化試劑,都是以細菌堿裂解為基礎和前提的。堿裂解中DNA充分的變性和后續復性,以及操作過程中避免基因組DNA大量斷裂降解, 都是保證后續質粒純化有效進行的必要條件。

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