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      Vigorous Biotechnology

      威格拉斯生物技術

      (北京)有限公司

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      報告基因檢測技術概述

      報告基因檢測分析方法,是功能基因組學研究的一個重要手段,同時在反式作用蛋白的機制研究,和相關藥物或蛋白篩選工作中,有廣泛的應用。報告基因分析系統,是把順式調控元件(DNA非編碼序列)與一種編碼新的產物的DNA序列--被稱為報告基因的序列連接起來,在細胞內該基因的轉錄翻譯過程中,測定報告基因的表達產物量或活性,來判斷順式調控元件的調控作用。這種間接的測定技術,提供了一種簡單、有效、有時是唯一可行的檢測體系。

      理想的報告基因通常應具備以下特點:基因產物必須能與轉染前真核細胞內任何相似的產物相區別;細胞內其它的基因產物不會干擾報告基因產物的檢測;基因產物在細胞內的含量能夠實時反映該基因的轉錄活性狀態;報告基因編碼產物的檢測方法應該快速、簡便、靈敏度高而且重現性好。熒光素酶(luc) 、β-半乳糖苷酶(β-gal) 、氯霉素乙酰轉移酶(CAT) 、β-葡萄糖苷酸酶(GUS) 、分泌型堿性磷酸酶(SEAP) 、綠熒光蛋白( GFP) 、生長激素(hGH)等是實驗室較為常見的報告基因。

      報告基因檢測技術,涉及報告基因載體質粒構建、細胞轉染、報告基因產物測定等方法。在檢測體系中一般包含另一種報告基因質粒,共轉染同一細胞,以作為轉染效率和細胞數量、狀態的內參照。

      本公司生產的系列報告基因檢測試劑盒,分別應用于熒光素酶(luc) 、β-半乳糖苷酶(β-gal) 、氯霉素乙酰轉移酶(CAT)的報告基因活性檢測。其中的雙熒光素酶檢測試劑盒,是國內首次自行生產的產品,在許多實驗室長期使用,獲得了滿意的效果。氯霉素乙酰轉移酶活性檢測,通常需要用同位素方法,導致該方法很難在實驗室廣泛使用。我公司生產的氯霉素乙酰轉移酶活性檢測試劑盒,則首次采用熒光檢測方法,為研究人員提供一種簡便的選擇。

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